一、基线分离的核心判定标准
分离度（R）阈值
当相邻两峰的分离度（R）≥1.5时，可判定为基线分离
此时两峰峰谷位于基线上，无重叠干扰（分离度计算公式：$ R = \frac{2(t_{R2} - t_{R1})}{W1 + W2} $）
R=1.5：两峰接近完全分离（约99.7%符合正态分布）
R<1.0：峰明显重叠，无法满足分析要求
峰谷比参数
《中国药典》2025版新增峰谷比指标，用于评价未完全分离峰的干扰程度，需采用垂直积分方式计算
二、影响基线分离的关键因素
色谱柱性能
理论塔板数（N）：N越大，峰越窄，分离度越高（$ R ∝ \sqrt{N} $）
柱效下降时需截取柱头1-2cm或更换新柱
选择性因子（α）
α必须≠1（$ α = \frac{k_2}{k_1} $），且α越大分离效果越好
保留因子（k）
适当增加k可改善分离，但过大会延长分析时间（优化范围通常k=2-10）
三、操作验证方法
基线观察法
两峰间谷底与基线重合，且无信号波动（需排除检测器噪声干扰）。
半峰宽法
采用《中国药典》2025版修订后的半峰宽法计算分离度，替代原峰宽法
对称性检查
对称因子为1.0的峰在R=1.5时更易实现基线分离。
四、特殊场景处理
液相色谱：需注意溶剂效应和管路体积差异对峰形的影响
基线漂移：若基线不稳定，需先解决漂移问题再评估分离度
注：实际分析中需结合具体检测需求调整标准（如痕量分析可能要求R≥2.0）。
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