色谱柱脱气处理的最佳实践

一、液相色谱柱脱气处理的最佳实践

1. 脱气的必要性

液相色谱（HPLC）中，流动相中溶解的气体在高压下可能析出形成气泡，从而导致以下问题：

泵送不稳定：气泡影响流速精度，导致压力波动；

检测干扰：气泡进入检测器时可能引起基线噪声或漂移；

柱效下降：气泡堵塞色谱柱固定相，影响分离效果。

因此，流动相脱气是确保高效液相色谱分析准确性和重现性的关键步骤 [。

2. 常用的脱气方法

方法 原理 优点 缺点 适用场景

超声波脱气 利用超声波震荡使气体逸出 操作简单、成本低 脱气效率较低，时间较长 实验室常规分析

真空脱气 通过真空泵抽气降低气体溶解度 脱气效率高 可能改变流动相组成 单一溶剂体系

氦气/氮气吹扫 利用惰性气体置换溶解气体 脱气彻底，适合高精度分析 成本高，操作复杂 高精度检测如药物分析

加热回流法 加热流动相使气体逸出 脱气效果好 溶剂挥发风险高 大体积流动相处理

在线脱气机 仪器内置脱气装置，自动脱气 使用方便、效率高、适合长期运行 初期投入高 高效液相色谱仪配套使用

推荐做法：优先使用在线脱气机，尤其在日常分析中可确保流动相持续脱气，避免人工操作误差。若使用真空脱气或超声波脱气，建议在流动相配制后立即进行，并尽快使用 [。

二、气相色谱柱脱气处理的最佳实践

1. 脱气与老化处理

气相色谱柱在首次使用或污染后，通常需要进行老化处理，其目的不仅是脱气，还包括：

去除柱内残留的溶剂或杂质； 气相色谱 

稳定固定液，防止色谱峰拖尾或基线漂移；

恢复柱效，延长使用寿命。

2. 老化步骤

将色谱柱连接至检测器一端断开；

以**低流速（如1~2 mL/min）**通入载气（如氮气或氦气）；

缓慢升温至柱温上限以下10~20℃，保持数小时；

冷却后重新连接检测器，准备分析。

注意：老化过程中应避免氧气进入柱内，以免氧化固定液，影响柱性能 。

3. 常见故障与应对

污染：高沸点化合物吸附在柱内，可先高温老化，若无效则可截断柱头10~20 cm；

气泡干扰：多见于载气不纯或柱连接处漏气，需检查气体纯度和接口密封性；

分辨率下降：可能为固定液流失或柱效下降，需更换色谱柱。

三、综合建议

液相色谱：推荐使用在线脱气机，日常操作中避免频繁更换流动相，并定期检查脱气机运行状态；

气相色谱：新柱使用前或污染后应进行老化处理，老化温度不宜超过柱温上限，老化时间一般为4~8小时；

通用维护：无论液相还是气相色谱柱，使用前后都应保持柱内清洁，避免样品中颗粒物进入柱内，建议使用保护柱或前处理小柱过滤样品 [。

如需进一步了解特定品牌或型号的色谱柱脱气要求，建议查阅该色谱柱的使用说明书或联系厂家技术支持。