高效液相色谱法（HPLC）是测定植物油中维生素E含量的标准方法，可同时分离α、β、γ、δ四种生育酚异构体，具有高灵敏度、高准确度的特点
以下是该方法的核心要点：
方法原理
利用维生素E在294 nm处的特征吸收峰，采用C18反相色谱柱分离，以甲醇-水（98:2）为流动相，流速1.0 mL/min，柱温30℃外标法定量，标准曲线相关系数需≥0.999
样品前处理关键步骤
皂化：取2 g油样，加10 mL无水乙醇溶解，加入0.5 g抗坏血酸（防氧化）和5 mL 10%氢氧化钾溶液，70℃水浴30分钟
萃取：冰浴冷却后，用正己烷萃取3次，合并有机相氮吹至干（温度≤40℃）
定容：甲醇定容至2 mL，避光保存
注意：若皂化不完全可延长至45分钟；乳化时可离心或补加乙醇破乳
色谱条件优化
进样量：20 μL，运行时间15分钟
分离问题：若δ-生育酚与γ-生育酚分离度不足，可降柱温至25℃；拖尾峰可增加水比例至3%
检测器：紫外检测器（294 nm）或荧光检测器（激发298 nm，发射325 nm）
方法验证指标
回收率：85%-105%（符合GB 5009.82-2016）
精密度：同批次RSD<5%，实验室间偏差<8%
检出限：α-生育酚91.8 ng，γ-生育酚36.6 ng。
应用扩展
适用油品：芝麻油（基质干扰小）、菜籽油（需调整洗脱程序）
其他样本：维生素E软胶囊（取样量0.5 g）、调和油（需加标回收验证）
该方法通过皂化-萃取-色谱联用，可精准测定植物油中维生素E各组分含量，是食品质量控制的可靠手段
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