高压输液泵:提供稳定且有一定压力的流动相,确保样品均匀快速通过色谱柱,高压可增加溶质在固定相上传质速率,提高分离效率3。部分仪器如Accela高效液相色谱仪具备在15000psi超高压条件下工作的能力。
进样器:用于将样品引入色谱系统,有手动进样(如六通阀/定量环手动进样器)和自动进样器,自动进样器可提高分析准确性和重复性。
色谱柱:核心部件,由填充特定填料的管子组成,其长度、内径和填料粒度等参数影响分离效果。Accela高效液相色谱仪即为粒径小于2μm的色谱柱量身定制,还配有柱温箱、色谱柱外挂架等辅助设备。
检测器:检测从色谱柱流出的组分浓度变化,常见的有紫外可见光检测器(UV/Vis)、荧光检测器(FLD)、电化学检测器(ECD)和质谱检测器(MS)等,具有高灵敏度和高选择性。
数据处理系统(化学工作站):收集检测器信号并转换为可读图谱和数据报告,还可进行积分、校正和平滑处理等操作。
温控系统:控制色谱柱和流动相温度,因温度变化会影响组分溶解度、粘度和扩散系数等参数,进而影响分离效果3。
固定相与流动相:固定相是色谱柱内的填料,流动相可为单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等,反相色谱有特定的流动相选择。
高效液相色谱仪的应用领域
环保方面
农药残留量分析:可检测含氯农药、有机磷农药、除虫菊等。
致癌物质检测:如硝基呋喃及其代谢物、霉素、亚硝胺、苯并芘等。
水质分析:用于检测内分泌污染物等。
生化方面
蛋白质分析。
肽类分析。
核酸分析。
氨基酸分析。